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液相色譜的眼睛——檢測器

發布日期:2019-03-25 16:25:15 來源:天津市蘭博實驗儀器設備有限公司
    高效液相色譜系統是由液體輸送系統-泵、進樣器、色譜分離柱、檢測器和數據處理系統幾部分組成。檢測器是高效液相色譜系統的眼睛,它將樣品的物理或化學特性信息轉換成易測量的電信號輸入到記錄儀,并記錄下來,得到樣品組分分離的色譜圖。
    通常將檢測器分為通用型和選擇型2種,通用型檢測器是指可連續測量色譜柱流出物(包括流動相和樣品組分)的全部特性變化,如示差折光檢測器、蒸發光散射檢測器等;而選擇型檢測器是用以測量被分離樣品組分某種特性的變化,這類檢測器對樣品中組分的某種物理或化學性質敏感,而這一性質是流動相所不具備的,或至少在操作條件下不顯示,如紫外檢測器、光電二極管陣列檢測器、熒光檢測器等。
檢測器分類 檢測原理 特點 缺點
紫外-可見 光(UV-VIS)檢測器 基于Lambert-Beer定律,即被測組分對紫外光或可見光具有吸收,且吸收強度與組分濃度成正比。 很多有機分子都具紫外或可見光吸收基團,有較強的紫外或可見光吸收能力,因此UV-VIS檢測器既有較高的靈敏度,也有很廣泛的應用范圍。由于UV-VIS對環境溫度、流速、流動相組成等的變化不是很敏感,所以還能用于梯度淋洗。 1.對沒有紫外/可見波長吸收的樣品無法檢測2.流動相的選擇受到流動相組分對紫外可見光的吸收影響,現有紫外可見檢測器在常用的流動相下當波長低于210nm時檢測效果較差; 3.不同物質在同一檢 測波長下的響應因子不相同
二極管陣列檢測器(diode-array detector , DAD 以光電二極管陣列(或CCD陣列,硅靶攝像管等)作為檢測元件的UV-VIS檢測器。它可構成多通道并行工作,同時檢測由光柵分光,再入射到陣列式接受器上的全部波長的信號,然后,對二極管陣列快速掃描采集數據,得到的是時 間、光強度和波長的三維譜圖。與普通UV-VIS檢測器不同的是,普通UV-VIS檢測器是先用單色器分光,只讓特定波長的光進入流動池。而二極管陣列UV-VIS檢測器是先讓所有波長的光都通過流動池,然后通過一系列分光技術,使所有波長的光在接受器上被檢 特點與紫外檢測器相同,同時可動態的在同一時間檢測所有波長下的吸收。 1.與紫外可見家測起相
2.靈敏度和重現性低 于紫外檢測器。
示差折光檢測器(differential refractometers, RI) 原理:基于樣品組分的折射率與流動相溶劑折射率有差異,當組分洗脫出來時,會引起流動相折射率的變化,這種變化與樣品組分的濃度成正比。 RI 檢測器根據其設計原理可分為反射型(根據Fresnel定律)、折射型(根據Snell定律)和干涉型三種類型。 示差折光檢測法也稱折射指數檢測法。絕大多數物質的折射率與流動相都有差異,所以RI是一種通用的檢測方法。雖然其靈敏度比其他檢測方法相比要低1-3個數量級。對于那些無紫外吸收的有機物(如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴)是比較適合的。在凝膠色譜中是必備檢測器,在制備色譜中也經常使用。 1.靈敏度很低
2.不能用于梯度洗脫系統
蒸發光散射檢測器(evaporative light-scattering detector, ELSD) ELSD是基于溶質的光散射性質的檢測器。由霧化器、加熱漂移管(溶劑蒸發室)、激光光源和光檢測器(光電轉換器)等部件構成。色譜柱流出液導入霧化器,被載氣(壓縮空氣或氮氣)霧化成微細液滴,液滴通過加熱漂移管時,流動相中的溶劑被蒸發掉,只留下溶質,激光束照在溶質顆粒上產生光散射,光收集器收集散射光并通過光電倍增管轉變成電信號。 因為散射光強只與溶質顆粒大小和數量有關,而與溶質本身的物理和化學性質無關,所以ELSD屬通用型和質量型檢測器。適合于無紫外吸收、無電活性和不發熒光的樣品的檢測。其靈敏度與載氣流速、汽化室溫度和激光光源強度等參數有關。與示差折光檢測器相比,它的基線漂移不受溫度影響,信噪比高,也可用于梯度洗脫。檢測任何不揮發樣品,提供精確的樣品組份和幾乎相同的響應因子,靈敏度高于RI、低波長紫外檢測器和其他ELSD,不需要日常維護,可和HPLC、GPC和SFC連用 流動相相不能含有不揮發組分(可使用有機酸堿替代)
熒光檢測器(fluorescence detector) 許多有機化合物,特別是芳香族化合物、生化物質,如有機胺、維生素、激素、酶等,被一定強度和波長的紫外光照射后,發射出較激發光波長要長的熒光。熒光強度與激發光強度、量子效率和樣品濃度成正比。有的有機化合物雖然本身不產生熒光,但可以與發熒光物質反應衍生化后檢測。 結構 有非常高的靈敏度和良好的選擇性,靈敏度要比紫外檢測法高2-3個數量級。而且所需樣品量很小,特別適合于藥物和生物化學樣品的分析。 1.樣品的選擇性較強
2.其它與紫外檢測器相似

天津蘭博提供示差折光檢測器、蒸發光散射檢測器、紫外檢測器、光電二極管陣列檢測器、熒光檢測器等各種類型檢測器。
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